端粒是真核细胞染色体末端的⼀个特殊结构,由⼀段具有特定重复的DNA序列和端粒结合蛋白组成,是维持染⾊体结构稳定的重要因素。端粒酶是⼀种核糖核酸蛋白酶,能够利用自⾝RNA为模板合成端粒DNA,使端粒延伸并维持其稳定。端粒酶功能⾏使最低限度需要两个部分,RNA组成和催化亚单位。RNA组分(human telomerase RNA,hTR)为端粒酶合成端粒重复序列提供了模板,催化亚单(human telomerase revese transcriptase,hTERT)含有保守的逆转录酶模体。
研究发现hTERT mRNA与端粒酶的活性相⼀致,正常组织阴性,80%以上的肿瘤组织呈阳性,说明hTERT可能是合成端粒酶全酶的关键,与肿瘤的关系更为密切。总结近年文献,其它各类肿瘤的端粒酶活性表达情况⼤致如下:头颈部鳞癌90%,脑肿瘤66〜94%,卵巢癌100%,胰腺癌95%,前列腺癌78~90%,神经母细胞94%。
试剂盒通过⼀步法RT-PCR对hTERT mRNA进行反应合成特异片段,并结合使用特异的Taqman-MGB荧光探针技术,以实现实时定量的检测模板的浓度。Taqman-MGB探针的5'端标记为FAM荧光素,3'端标记NFQ(Non Fluorescent Quencher)-MGB。